抑制HO-1增强As2O3对胶质瘤疗效的实验研究
刘耀华 陈晓丰 梁元 郑秉杰 赵世光
哈尔滨医科大学附属第一医院 神经外科
It was proved that subarachnoid injection of As2O3 is safe.
Intraoperative transplantation of Ommaya device
(ACNU or ACNU+As2O3)
Preoperation
One year after operation
47 male, Grade Ⅲ-Ⅳ：
Ommaya device (ACNU+As2O3),Arterial chemotherapy (As2O3),and Radiotherapy
Recurrent glioma
6 months after the second operation
54 female, Grade Ⅲ:
Ommaya device (ACNU+As2O3),Arterial chemotherapy (As2O3),and Radiotherapy
47 female, Grade Ⅲ-Ⅳ:
Ommaya device (ACNU+As2O3),Arterial chemotherapy (As2O3),and Radiotherapy
Preoperation
2 years after operation
Before
operative MRI
Preoperative CT
CT one week after
operative and the
first chemotherapy
Case3
MRI before operation
CT one and half a year after operation
44 male, Grade Ⅲ:
Ommaya device (ACNU+As2O3),Arterial chemotherapy (As2O3),and Radiotherapy
国内外研究发现As2O3在实体肿瘤治疗受到限制，小剂量药物不能达到治疗效果，而增大剂量往往增加药物毒性；
As2O3作用于细胞后不仅引起细胞毒性效应，同时还激活细胞内一些保护性分子和信号通路；
As2O3诱导细胞凋亡的机制被认为主要是通过活性氧（ROS）的诱导而实现；
ROS可以诱导细胞保护性分子血红素加氧酶-1(HO-1);
HO-1在胶质瘤中广泛表达；
抑制HO-1是否可以提高As2O3对胶质瘤的治疗效果？
三氧化二砷（As2O3）与肿瘤治疗
研究背景
实验设计
胶质瘤细胞系U251MG用As2O3处理，检测细胞活性、线粒体膜电位（MMP），并观察ROS清除剂LNAC对细胞是否有保护作用；
检测As2O3诱导胶质瘤细胞ROS生成、MAPK信号通路的活化，HO-1的诱导以及LNAC对其影响；
使用HO-1的诱导剂和抑制剂处理细胞，观察其对As2O3效应的影响；
Nrf2是HO-1表达的重要转录因子，SiRNA技术干扰Nrf2表达后对比细胞对As2O3的敏感性。
Cell Viability
** P<0.01 compared with control;
▼P<0.01 compared with LNAC untreated cells.
Mitochondrial Membrane Potential
Sub-G1 (PI Staining)
ROS induction
Downstreams of ROS
Nrf2 Translocation
Effects of HO-1 inducer
*
P<0.01
Effects of HO-1 inducer
*
P<0.01
Effects of HO-1 inhibitor
*
P<0.01
*
P<0.01
Nrf2
GAPDH
Random
Nrf2
HO-1
-actin
0h 3h 6h
Random
0h 3h 6h
Nrf2
ATO (5uM)
Knockdown of Nrf2
Knockdown of Nrf2
*
P<0.01
Knockdown of Nrf2
Knockdown of Nrf2
*
P<0.01
ATO
ROS
Nrf2 activation
Cell death
HO-1 induction
